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HaloTag®蛋白标签技术是基于经过改造的催化活性缺失的细菌水解酶,蛋白大小为34kDa,在生理条件下能与氯化烷烃配基(HaloTag®配基)结合形成高度特异性不可逆的共价键。通过使用不同的配基可控制带有HaloTag®蛋白标签的待测蛋白的功能和应用。HaloTag®系统具有从细胞学实验到生化实验的广泛应用灵活性,无需转换融合蛋白标签或重新克隆。    Promega提供HaloTag®克隆载体及配基。HaloTag®载体包括多克隆位点载体和专利的Flexi®克隆技术的载体。配基包括细胞渗透性和非渗透性荧光配基、生物素配基及反应性配基,反应性配基可用于建立自定义的HaloTag®连接结构。  HaloTag®配基(氯化烷烃+功能基团)荧光配基:用于细胞成像,蛋白相互作用检测(BRET)。具有不同颜色的荧光基团。非荧光配基:用于蛋白检测,如生物素Biotin,PEG-Biotin。表面配基:用于蛋白纯化,蛋白相互作用研究(Pull-down),磁珠,树脂,微阵列芯片。反应性配基:用于连接功能基团,如正电子成像术(PET)配基,磁共振试剂。技术优势最小化背景:HaloTag®蛋白标签与其他哺乳细胞蛋白没有同源性。不可逆的共价结合:Hal...
发布时间: 2016 - 12 - 26
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循环游离DNA(Circulating cell free DNA, CCFDNA)于1948年被首次发现。随后的研究发现,和健康人相比,在自身免疫疾病、癌症病人中的ccfDNA水平增高。ccfDNA是十分有应用前景的 biomarker,在疾病的早期诊断、预后、监测等方面具有重要潜在价值。具体应用可能包括:       1. 用于产前诊断       2. 用于免疫性疾病等非肿瘤类疾病的病情分析与疗效观察       3. 用于肿瘤相关分析           对于ccfDNA的研究可能具有很高的应用价值,但ccfDNA的含量很低,从血浆中提取的难度大。同时下游的检测,对ccfDNA的纯化质量也有很高的要求。所以选择合适的ccfDNA纯化方法是开展后续研究非常关键的第一步。
发布时间: 2016 - 12 - 26
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发布时间: 2016 - 12 - 26
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PD-1是表达在活化的T细胞和B细胞表面的免疫抑制性受体,在调节肿瘤抗原和自身免疫抗原应答过程中发挥重要作用。PD-1通过表达在相邻细胞的配体PD-L1或PD-L2,抑制TCR信号通路和TCR-介导的细胞增殖以及细胞因子的产生。用于抑制PD-1/PD-L1相互作用的治疗性抗体和Fc融合蛋白,在针对多种癌症治疗的临床试验中表现出了值得期待的效果。  PD-1/PD-L1 Blockade Bioassay是一种具有生物相关性,可以反应作用机制(Mechanism of Action)的细胞学检测方法,专门用于检测阻断PD-1/PD-L1相互作用的抗体或其他生物大分子的药效和稳定性。该方法的核心组成部分包括2种经过基因工程改造的细胞系:  PD-1/PD-L1 Effector Cells:Jurkat T细胞稳定表达人PD-1和NFAT-诱导的萤光素酶  PD-L1 aAPC/CHO-K1 Cells: CHO-K1细胞稳定表达人PD-L1和一个依赖抗原方式激活同源TCR的细胞表面蛋白  当两种细胞共培养时,PD-1/PD-L1相互作用会抑制TCR信号通路和NFAT-介导的萤光素酶活性。加入PD-1或PD-L1的抗体阻断PD-1/PD-L1抑制信号,会引起TCR信号和NFAT-介导的萤光素酶活性增加。&#...
发布时间: 2016 - 12 - 26
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