对于一个以发光为己任的萤光素酶来说,个头小有什么好处呢?
【1】 第一个作用就是可以用来做融合蛋白标签啦!由于萤火虫和海肾萤光素酶的个头太大,导致它们一直没法打入融合蛋白的市场。而NanoLuc的个头只有19kDa。比我们所熟悉的GFP融合蛋白(大约27kDa)还要小不少,所以萤光素酶家族终于可以头顶青天泪流满面的说:我终于可以做融合蛋白啦!
【2】 这个来自深海小龙虾的蛋白,在哺乳动物细胞中表达时,没有特殊的翻译后修饰或者奇葩的细胞内定位,表现异常稳定。而当作为报告基因来使用时,我们还可以通过加入一些降解序列,来降低其细胞内积累的本底,这样能够对于微妙的调控变化做出更加显著的响应。
【3】 由于这个蛋白个头很小,所以会玩的城里科学家们为它搞出了一个新的玩法——分泌型表达!只要为NanoLuc加上一段分泌序列,这个蛋白就会分泌到细胞外的培养环境中,在做报告基因检测时,我们可以无需裂解细胞,只需要抽取一定的培养上清即可进行检测,是不是更方便了呢?