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CYP450 Assay Systems
产品名称:

CYP450 Assay Systems

上市日期: 2017-02-15

 P450-Glo™ CYP450 Assays(P450-Glo™ CYP450 检测试剂盒) 为检测细胞色素P450 酶类活性的均质的发光检测方法。

产品概述

P450-Glo™ CYP2B6 Assay 10ml V8321

P450-Glo™ CYP2B6 Assay 50ml V8322

P450-Glo™ CYP1A2 Induction/Inhibition Assay 10ml V8421

P450-Glo™ CYP1A2 Induction/Inhibition Assay 50ml V8422

P450-Glo™ CYP3A4 Assay with Luciferin-IPA 10ml V9001

P450-Glo™ CYP3A4 Assay with Luciferin-IPA 50ml V9002

P450-Glo™ CYP3A4 Assay (Luciferin-PPXE) DMSO-Tolerant Assay 10ml V8911

P450-Glo™ CYP3A4 Assay (Luciferin-PPXE) DMSO-Tolerant Assay 50ml V8912

P450-Glo™ CYP3A4 Assay (Luciferin-PFBE)Cell-Based/Biochemical Assay 10ml V8901

P450-Glo™ CYP3A4 Assay (Luciferin-PFBE)Cell-Based/Biochemical Assay 50ml V8902

P450-Glo™ CYP1A1 Assay 10ml V8751

P450-Glo™ CYP1A1 Assay 50ml V8752

P450-Glo™ CYP1B1 Assay 10ml V8761

P450-Glo™ CYP1B1 Assay 50ml V8762

P450-Glo™ CYP1A2 Assay 10ml V8771

P450-Glo™ CYP1A2 Assay 50ml V8772

P450-Glo™ CYP2C8 Assay 10ml V8781

P450-Glo™ CYP2C8 Assay 50ml V8782

P450-Glo™ CYP2C9 Assay 10ml V8791

P450-Glo™ CYP2C9 Assay 50ml V8792

P450-Glo™ CYP3A4 Assay 10ml V8801

P450-Glo™ CYP3A4 Assay 50ml V8802

P450-Glo™ CYP3A7 Assay 10ml V8811

P450-Glo™ CYP3A7 Assay 50ml V8812

P450-Glo™ CYP2C19 Assay 10ml V8881

P450-Glo™ CYP2C19 Assay 50ml V8882

P450-Glo™ CYP2D6 Assay 10ml V8891

P450-Glo™ CYP2D6 Assay 50ml V8892

可单独购买

NADPH Regeneration System 1,000 assays V9510

 

这些检测试剂盒用于检测重组的和天然的 P450 酶类的活性,也可用于评估受试样品(如药物或新化合物)对P450 酶类活性的影响。这些发光法检测试剂盒具有卓越的灵敏度、极低的背景信号和宽广的动态范围。

P450-Glo™ 检测试剂盒采用的P450 发光前体底物为甲虫萤光素的衍生物。未发生反应时,该衍生物不是萤光素酶的底物,然而,当 P450 酶类将该物质转换成萤光素时,即成为萤光素酶的底物,并与萤光素酶作用而发光,发光的强度与 P450 酶的活性直接呈正比。

P450-Glo™ 检测试剂盒产生“辉光型”的发光信号,该光信号由重组的稳定化处理的萤光素酶(超稳萤光素酶,Ultra-Glo™ luciferase)以及专利的缓冲液系统共同作用产生的。发光信号的半衰期大于 2 个小时,因而不要求发光检测仪必须带有自动进样器,并可批量处理样品。当筛选细胞色素P450 酶类的抑制剂时,该系统的独特配方还可以减少由于受试样品而导致的萤光素酶活性抑制所带来的假阳性结果。

P450-Glo™ CYP3A4 Assay with Luciferin-IPA(含Luciferin-IPA 的 P450-Glo™ CYP3A4 检测试剂盒)含有 CYP3A4 的底物,特别适合于人源 CYP3A4 有关的检测,也是最适用于细胞水平检测的底物。Luciferin-IPA 可直接被细胞摄取,并可在胞内快速转变为萤光素,大大减少了实验所要求的孵育时间。使用Luciferin-IPA 所得到的低背景和高信噪比意味着实验的原始材料可以大为减少。DMSO 是一种用于药物筛选实验的常用媒介,P450-Glo™ CYP3A4 Assay with Luciferin-PPXE 是DMSO 耐受型检测试剂盒。

DMSO (Dimethyl sulfoxide,二甲亚砜) 即使在很低的浓度(<0.1%)下,仍然可以抑制细胞色素P450 中 3A4 异构体的活性。P450-Glo™ CYP3A4 System (Luciferin-PPXE)DMSO-Tolerant Assay 是为在 3A4 反应中能耐受 DMSO 而设计。与不含 DMSO 的对照相比,该检测法在0.2% 的 DMSO 存在时,信号: 背景比很少改变或不改变。

参见表1了解细胞色素酶P450、建议使用的底物和实验方法。

特点 - 优点

• 结果可靠:更宽广的动态范围、低背景信号和更好地敏感性让结果更加可靠。

• 避免荧光干扰:荧光输出信号无荧光检测化合物的信号干扰。

• 节约时间:简便的“加样-读数”操作模式节省时间。

• 假阳性率极低:特殊形式的荧光信号将假阳性率降到最低。

• 节约资金:可以轻松地升级至384 孔板检测模式,减少每孔成本。

• 可进行自动化检测:自动化方法已经经过确证,详情请查看 
www.promega.com/automethods/

• 自选配置:如需了解我们的定制服务,请联系普洛麦格(北京)生物技术有限公司(
www.promega.com/custom/)。

应用

• 从不同的表达系统中如 Sf9 细胞和E.coli检测膜组分中重组 CYP450 的活性

• 从组织和细胞的微粒体等结构中检测天然 CYP450 的活性

• 从药物和化合物对于天然或重组 CYP450 活性的影响对其进行筛选

储存条件

将CYP1A2、CYP2C9 和 CYP3A4 膜制备物储存于-70℃。反复的冻融循环可使细胞色素P450 活性丧失。将CYP1A2、CYP2C9 和 CYP3A4 膜制备物分装成单次用量的小份( 如:50μl 用于 96 个反应),避免多次冻融。将这些小份的膜制备物存于-70℃。将其它所有组分储存在-20℃或-70℃,避光。

 

CYP450 Assay Systems

Table 1. Cytochrome P450 Enzymes, Recommended Substrates and Assay Formats.

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