TSAP Thermosensitive Alkaline Phosphatase（TSAP 热敏感碱性磷酸酶）可以催化 DNA 的 5'- 末端去磷酸基团，阻止线性化的克隆载体 DNA 在连接反应中重新环化及再连接；对于 3' 突出端、5' 突出端及平末端都具有活性。也可通过 5' 末端磷酸基团的脱磷酸来制备 5' 末端标记 DNA。
TSAP 在 74℃加热 15 分钟会发生不可逆的失活。因此在连接反应之前不需要纯化 DNA。在多种条件下测试，TSAP 在所有的限制性内切酶反应缓冲液中都具有活性，这有利于限制性酶切反应、去磷酸化和连接反应的连续进行。
特点 - 优点
• 易操作：TSAP 在 Promega 所有的限制性酶切缓冲液中都有活性，可以省掉纯化步骤或者不需更换缓冲液。
• 加热失活：当 74℃加热 15 分钟后，TSAP 完全不可逆失活，这使得碱性磷酸酶处理后无需纯化即可进行下游操作，如内切酶消化、脱磷酸及连接操作。
• 蓝/ 白克隆验证：Promega 的蓝/ 白克隆检测为用于克隆的酶提供了高水平的质量控制。
• 提供 MULTI-CORE™ 反应缓冲液。
应用
• 通过移除 5' 端磷酸基团，防止克隆空白载体线性化 DNA 的重连
• 在用 T4 多聚核苷酸激酶进行末端标记前移除 5' 端磷酸基团
注意事项
所列出的单位为 MBU（分子生物学单位）。
来源
Bacteria.
存储缓冲液
10mM Tris (pH 7.5 @ 25°C), 100mM NaCl, 50% glycerol.
储存条件
储存于 -20℃。保质期请见标。
单位定义
One MBU is defined as the amount of enzyme required to dephosphorylate 1μg of pGEM® DNA with 3´ overhangs in 15 minutes at 37°C in a 50μl reaction using any Promega restriction enzyme buffer (except F). Dephosphorylation is defined as preventing >95% of the plasmid from ligating (analyzed by agarose gel electrophoresis).