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Cell-Based Proteasome-Glo™ Assays
产品名称:

Cell-Based Proteasome-Glo™ Assays

上市日期: 2017-01-17

Proteasome-Glo™ Cell-Based Assay(Proteasome-Glo™细胞检测试剂盒) 是一种均质的发光检测方法,能分别检测细胞培养物中蛋白酶体相关的类胰凝乳蛋白酶、类胰蛋白酶和类caspase的蛋白酶活性。26S 的蛋白酶体是一种存在于所有真核细胞中的2.5MDa 的多蛋白复合体。


产品概述

Proteasome-Glo™ Chymotrypsin-Like Cell-Based Assay 10ml G8660

Proteasome-Glo™ Chymotrypsin-Like Cell-Based Assay 5 × 10ml G8661

Proteasome-Glo™ Chymotrypsin-Like Cell-Based Assay 2 × 50ml G8662

Proteasome-Glo™ Trypsin-Like Cell-Based Assay 10ml G8760

Proteasome-Glo™ Trypsin-Like Cell-Based Assay 5 × 10ml G8761

Proteasome-Glo™ Caspase-Like Cell-Based Assay 10ml G8860

Proteasome-Glo™ Caspase-Like Cell-Based Assay 5 × 10ml G8861

Proteasome-Glo™ 3-Substrate Cell-Based Assay System 10ml G1180

Proteasome-Glo™ 3-Substrate Cell-Based Assay System 50ml G1200


Proteasome-Glo™ 细胞检测试剂盒在缓冲液中提供可发光的蛋白酶体底物,该试剂经过了优化,使细胞通透性、蛋白酶体活性和萤光素酶活性均达到最佳。以" 加样- 混合- 检测" 的方式加入Proteasome-Glo™ 细胞学检测试剂,引发蛋白酶体剪切底物,并通过萤光素酶反应快速产生发光信号。

用于检测三种特异蛋白酶活性的发光前体底物包括:用于检测类胰凝乳蛋白酶活性的Suc-LLVY- 氨基萤光素、用于检测类胰蛋白酶活性的Z-LRR- 氨基萤光素以及用于检测类caspase 活性的Z-nLPnLD- 氨基萤光素。每种发光底物都加入到经过优化的缓冲液中,使之更适于相应的蛋白酶体活性和萤光素酶活性。将试剂加入到包含蛋白酶体的测试样品中,就能剪切底物、释放萤光素,后者经萤光素酶的作用,产生" 辉光型" 发光信号,发光强度与酶的活性或抑制性相关。

Proteasome-Glo™ 3-Substrate Cell-Based Assay System(Proteasome-Glo™ 3 底物细胞检测系统) 是由3 个均质的生物发光检测系统构成,能够检测细胞培养物中3 种与细胞蛋白酶体相关的蛋白水解活性( 这三种检测试剂盒均可单独购买)。

Proteasome-Glo™ 3-Substrate System(Proteasome-Glo™ 3底物系统) 由三种均质的发光检测试剂盒组成,用于检测纯酶。其中的任何一个试剂盒均可单独购买。


特点 - 优点

  • 实验结果更具有生物相关性:使用此系统可直接从细胞环境中得到蛋白酶体活性的数据。

  • 方法经过简化:" 加样- 混合- 检测" 操作程序最大程度地减少了手工处理步骤,并且使该试剂盒更适于自动化操作。

  • 更快速地得到结果:在加入试剂10-30 分钟后可达到最高灵敏度。

  • 更高的灵敏度:发光检测模式避免了荧光方法所固有的背景信号,提供优良的信号- 背景读数。该检测试剂盒可用于384 孔板。

应用

  • 在培养细胞内检测蛋白酶体的糜蛋白酶样、胰蛋白酶样和半胱天冬酶样活性。

  • 在细胞内筛选抑制剂文库以及监控蛋白酶调控的蛋白降解过程。

注意事项

Cat.# G8660, G8760, G8860和G1180 (对于三个系统中的每一个来说)能够在96孔板内完成100次实验,每次最终用量为100μl或在384孔板内完成400次实验,每次最终用量为25μl。Cat.# G1200(对于三个系统中的每一个来说)能够在96孔板内完成500次实验,每次最终用量为100μl或在384孔板内完成2000次实验,每次最终用量为25μl。

Cell-Based Proteasome-Glo™ Assays

Figure 1. The luminogenic substrates containing the Suc-LLVY, Z-LRR or Z-nLPnLD sequence are recognized by the 20S proteasome.

Cell-Based Proteasome-Glo™ Assays

Figure 2. Luminescent signal is proportional to cell number and linear over three logs of cell number (r2 = 0.99, slope = 0.94).

Cell-Based Proteasome-Glo™ Assays

Figure 3. Monitoring proteasome inhibition using different inhibitors and cell lines.



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