RNasin® Ribonuclease Inhibitors

RNasin® Ribonuclease Inhibitor 2,500u 20–40u/μl N2111

RNasin® Ribonuclease Inhibitor 10,000u 20–40u/μl N2115

Recombinant RNasin® Ribonuclease Inhibitor 2,500u 20–40u/μl N2511

Recombinant RNasin® Ribonuclease Inhibitor 10,000u 20–40u/μl N2515

RNasin® Plus RNase Inhibitor 2,500u 40u/μl N2611

RNasin® Plus RNase Inhibitor 10,000u 40u/μl N2615

可用于下游应用GoScriptTM Reverse Transcriptase、AMV/M-MLV Reverse Transcriptase、SP6、T7/T3 RNA聚合酶和Taq DNA聚合酶的试验。Recombinant RNasin® Inhibitor不抑制RNase T1、S1核酸酶、曲霉（Aspergillus）来源的RNase以及RNase H、RNase ONETM Ribonuclease和其它酶类。Learn more about these products.

RNasin® Plus RNase Inhibitor是一种作为可溶性蛋白在E. coli中表达的重组哺乳动物RNase抑制剂，可以利用离子交换和疏水层析相结合的方法纯化获得。该蛋白能够抑制真核RNase（如RNase A和RNase B）活性，与人胎盘RNase抑制剂相似。RNasin® Plus RNase Inhibitor经过RT-PCR检验，能与AMV、M-MLV、ImProm-IITMReverse Transcriptase或Taq、Tfl DNA Polymerase兼容。RNasin® Plus RNase Inhibitor也能和TaqMan®定量、实时RT-PCR兼容。

与人源的这种蛋白相比，RNasin® Plus RNase Inhibitor具有更高的抗氧化活性。研究表明来源于人的该蛋白的两个半胱氨酸对氧化非常敏感，并形成二硫键封闭了抑制剂的活性位点。利用天然氨基酸的多样性，RNasin® Plus RNase Inhibitor不会形成封闭活性位点的二硫键。此外，还发现这种重组蛋白具有以前从未认识的特性，即在50°C以上能持续抑制RNase。将RNasin® Plus RNase Inhibitor和RNase的溶液加热再冷却，不会造成RNase活性的恢复——即使溶液温度超过RNasin® Plus蛋白的变性温度。因此，RNasin® Plus RNase Inhibitor能够在加热前、加热中及加热后保护RNA，即使在RT-PCR中第一链DNA合成温度下亦如此。溶液加热至70°C，15分钟，没有观察到RNase的活性恢复。

特点 - 优点

• 广谱的RNase抑制剂：抑制常见真核生物的RNase。

• 可与多种酶共同使用：不会抑制SP6、T7、T3 RNA Polymerase；GoScript™ Reverse Transcriptase、AMV或M-MLV Reverse Transcriptase；以及Taq DNA polymerase的活性。

• 用于多种下游试验：PH范围宽（PH5-8）。

• 天然和重组两种形式可选：重组形式的RNase抑制剂来源于细菌，减少了人类核酸的污染。

RNasin® Plus RNase Inhibitor also can:

•  增强的抗氧化能力：借助于天然氨基酸的多样性，RNasin® Plus RNase Inhibitor不能形成人源蛋白在氧化条件下会形成的封闭活性位点的二硫键。

•  高纯度：RNasin® Plus RNase Inhibitor是E. coli表达的可溶蛋白，利用离子交换和疏水层析相结合的方法很容易纯化获得。不需要直接亲和层析。这种方法可产生纯度>90%的抑制剂蛋白，无E. coli RNase残留。

• 与RT-PCR系统兼容：已经证明RNasin® Plus RNase Inhibitor可与Access和Access QuickTM RT-PCR System、M-MLV Reverse Transcriptase、ImProm-IITMReverse Transcription System和GoScript™ Reverse Transcription System兼容。同样也与基于TaqMan®的RT-PCR systems兼容。

• 在RNA模板变性过程中保护RNA：即使在70°C加热RNasin® Plus RNase Inhibitor和RNase的混合物15分钟，也不会导致RNA酶的活性复苏。许多RT-PCR操作方法需要在RT 反应前将RNA模板在RT引物存在时变性（例如65-70°C， 5-10分钟）以获得最大灵敏度。现在您可以在这一步骤中使用RNasin® Plus RNase Inhibitor。

•  可保护较高温度下的RT反应：使用ImProm-IITM和AMV Reverse Transcriptase等进行RT反应时，可加入RNasin® Plus RNase Inhibitor，在50°C以上进行反应。可能存在的RNase在高温下会失活。

应用

• RT-PCR和RT-qPCR。

• 用于受真核生物RNase污染影响的任何试验。

• 在cDNA合成反应中保护mRNA。

• 无RNase抗体染色。

• 体外转录/翻译。

• 转录/翻译偶联试验。

• 增加多核糖体的产量和活性。

• 增强病毒体外复制。

• 增强同源系统中RNA的翻译。

• 使用Riboprobe® System合成超高量的RNA。

Figure 1. Comparison of RNasin® Ribonuclease Inhibitor and RNaseOUT™ inhibition of RNase A during in vitro transcription.

pGEM® Express Control Template was transcribed using the RiboProbe® System—T7 following the instructions in Technical Manual #TM016. All reactions were performed in duplicate. Expected sizes in bases are displayed on the right of the gel image, and marker sizes in kb are listed on the left. The graph was generated by quantitating the bands on the gel and calculating a percent RNA compared to the positive control (polymerase + template). Error bars represent the two separate reactions. The black bars are quantitation of the top bands (2,346 bases) and the grey bars are quantitation of the bottom bands (1,065 bases).

Figure 2. Gel images of RNA samples created by the Agilent Bioanalyzer system.

We analyzed samples with varying concentrations of Recombinant RNasin® Ribonuclease Inhibitor before and after six weeks of storage with repeated freeze-thaw cycles. Panel A.Represents samples before storage. Panel B. Represents samples after the six-week period. The gel models demonstrate that the samples show little RNA degradation.