用于细胞成像的HaloTag® Fluorescent Ligand

可透过细胞膜的荧光配基（快速标记步骤）：

• HaloTag® TMR Ligand (555Ex/585Em)

• HaloTag® Oregon Green® Ligand (496Ex/516Em)

• HaloTag® diAcFAM Ligand (494Ex/526Em)

• HaloTag® Coumarin Ligand (353Ex/434Em)

   

用于细胞表面标记的不能透过细胞膜的荧光配基（快速标记步骤）：

• HaloTag® Alexa Fluor® 488 Ligand (494Ex/517Em)

• HaloTag® Alexa Fluor® 660 Ligand (663Ex/690Em)

可透过细胞膜的荧光配基（“无漂洗”步骤）：

• HaloTag® TMRDirect™ Ligand (555Ex/585Em)

• HaloTag® R110Direct™ Ligand (502Ex/527Em)

Alexa Fluor® 488 Ligand不能穿透细胞膜，用于标记细胞表面蛋白。TMR Ligand, Oregon Green® Ligand, diAcFAM Ligand 和Coumarin Ligand容易透过细胞膜，用于标记细胞内蛋白。

用于蛋白检测的HaloTag® Ligand：
HaloTag® Biotin Ligand是由一段12个原子的反应接头（reactive linker）连接到生物素分子上构成的，用作捕获HaloTag®融合蛋白的亲和标签。此配基依靠生物素-链霉亲和素之间强劲的相互作用实现蛋白捕获。

HaloTag® PEG-Biotin Ligand包含一段HaloTag® Biotin Ligand里没有的间隔臂（spacer）。这个间隔臂显著延长了链霉亲和素与HaloTag®蛋白之间接头的长度，并增加了接头的柔韧度，利于在固相化或衍生化过程中保持与HaloTag®蛋白融合的目的蛋白的活性。

特点 - 优点

• 支持液相或固相载体标记：HaloTag®配基与HaloTag®蛋白或融合蛋白的结合具有高度的特异性和亲和性。

• 活细胞内标记HaloTag®蛋白：HaloTag® TMR、diAcFAM、 Coumarin 和Biotin Ligand容易穿透细胞膜。

• Pull Down蛋白复合体：HaloTag® PEG-Biotin Ligand的间隔臂和反应接头提供了理想的pull-down性能。也可使用HaloLink™ Resin直接pull down。

• 固定细胞也可成像：HaloTag®蛋白与配基间的共价键十分稳定，可以对固定的细胞成像，允许在严苛的条件下分析标记的蛋白。

• 引入新的功能或实现顺序标记：开放的技术架构允许使用不同的配基进行多重应用。

• 在多重实验中只需设计一个基因表达载体：使用不同的HaloTag® Ligand即可获得新的的功能而无需设计新的表达克隆。

• 可以使用SDS-PAGE和质谱等技术分析标记的融合蛋白：共价结合的配基在变性条件下仍然稳定。

应用

• 蛋白定位

• 蛋白转运

• 蛋白捕获

• Cell-to-gel分析

• 蛋白相互作用（protein:protein interaction, PPI）分析