Eastep® RT Master Mix 和Eastep® qPCR Master Mix是Promega上海生产基地——上海普洛麦格生物产品有限公司生产的最新逆转录和qPCR产品。Eastep® RT Master Mix名称目录号规格反应次数目录价Eastep® RT Master Mix (5×)LS2050100μl50次(10μl反应体系)380LS2052400μl200次(10μl反应体系)1099Eastep® RT Master Mix (5×) (包含No-RT Control)LS2054400μl200次(10μl反应体系)1099Eastep® RT Master Mix 是用来合成cDNA第一链的优质反转录反应试剂。本产品为5x预混液,主要成份包含高效率逆转录酶M-MLV、MgCl2、dNTP、Oligo(dT)15 Primer、Random Primers、RNase inhibitor和反应缓冲液,只需添加模板RNA和水即可迅速地开始反应。本产品适用于合成Real Time PCR用短链目的片段cDNA模板,能够进行高性能的基因表达分析;同时也适用于高效合成全长的cDNA模板,对扩增2K左右的片段效率更高。产品中加入gDNA Remover能有效去除RNA模板中的gD...
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来自人类细胞图谱联盟(Human Cell Atlas Consortium)的研究人员在利用强大的单细胞基因组分析工具了解人类早期发育和这如何能够影响健康或导致疾病方面迈出第一步。迄今为止,人类发育细胞图谱(Human Developmental Cell Atlas, HDCA)的初步项目已对100万个细胞中的四分之一进行了测序,而且首批数据分析正在进行中。HDCA计划将为所有对人类发育比较重要的细胞构建基因组参考图谱,这将彻底改变我们对健康和疾病(从流产、儿童发育障碍到癌症和衰老)的理解。视网膜细胞,图片来自Irene Whitney, laboratory of Joshua Sanes, Klarman Cell Observatory, Broad Institute of MIT and Harvard; Harvard University。HDCA是雄心勃勃的人类细胞图谱(HCA)的一部分,其中HCA是一个全球性的联盟,旨在通过绘制人体内每个细胞的图谱来改变生物研究和医学。2018年3月8日,在英国惠康基金会基因组校园(Wellcome Genome Campus)举行的国际HCA会议上,HDCA和HCA的其他方面取得的进展会被讨论。许多疾病起源于人体早期发育,因此详细地理解发育是解释人类健康和疾病的关键。来自英国惠康基金会桑格研究所和纽卡斯尔大学的研究人员从来自...
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[创新技巧]如何利用CRISPR改造植物基因组如今,CRISPR技术已经用于许多植物基因组的改造,包括著名的模式生物,如拟南芥和蒺藜苜蓿,以及重要的经济作物,如马铃薯、玉米、小麦、水稻和蘑菇等。尽管CRISPR系统在大多数物种中都通用,但涉及到植物细胞的编辑,还是不能一成不变。Addgene的Joel McDade在此介绍了植物基因组的改造,突出了CRISPR系统针对植物的特定改变,并概括了科研人员的植物基因组编辑工具。CRISPR的各个组分总的来说,之前的实验设计规则也适用于植物的基因编辑。不过,常用的CRISPR质粒可能需要做一些改变,才能在植物细胞中起作用。与其他模式系统一样,Cas9或Cas9变异体和单链向导RNA(gRNA)的表达就足以修饰植物的基因组。与其他生物一样,gRNA也是由~20个核苷酸的靶向序列和~75个核苷酸的支架序列组成,不过驱动gRNA表达的启动子则取决于所使用的细胞类型。在植物细胞中,gRNA的表达可通过植物特异的RNA pol III启动子来驱动,如AtU6、TaU6、OsU6或OsU3。Addgene提供了30多种不含gRNA的骨架,方便你插入靶向序列,最快构建好载体。目前,研究人员已经对一些Cas9变异体进行密码子优化,以加强在植物细胞中的翻译。同时,他们也使用缺乏核酸酶活性的Cas9激活物(如dCas9-VP64)或阻遏物(dCas9-KRAB...
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Cell:基于高通量单细胞转录组测序小鼠全细胞图谱发表 在国家自然科学基金项目(项目编号:31722027)等资助下,浙江大学医学院干细胞与再生医学中心郭国骥教授团队在单细胞组学技术及哺乳动物全细胞表达谱系分析研究中取得突破性进展。相关成果以“Mapping the Mouse Cell Atlas by Microwell-seq”(利用微孔板测序技术绘制小鼠细胞图谱)为题,于2018年2月23日在生命科学国际顶尖期刊Cell(《细胞》)杂志在线发表。论文链接:http://www.cell.com/cell/fulltext/S0092-8674(18)30116-8。 长久以来,生命科学的研究主要针对群体细胞样品进行处理、分析和统计进而获得均值水平的实验结果。直到近几年单细胞组学技术的出现,才使我们能够从单细胞的水平更加精确地解析每个细胞究竟在表达哪些基因,在机体分化、再生、衰老以及病变过程中这些基因的表达又发生哪些变化以及变化的幅度有多大等问题。因此,单细胞组学分析技术不仅在方法学上是继传统的细胞检测、分类和鉴定技术的一次突破,而且其结果也将会对经典的细胞发生、组织分化、器官发育及功能稳态维持的分子细胞机制带来新的理解和认识。 在这项工...
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