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细胞凋焦亡(pyroptosis)也被称作Caspase 1-依赖的细胞死亡,是近年来发现并证实的一种新的程序性细胞死亡方式,是机体在感知病原微生物浸染后启动的免疫防御反应(炎症反应),在拮抗和清除病原感染以及内源危险信号中发挥重要作用。过度的细胞焦亡会诱发多种自身炎症性和自身免疫性疾病。    不同于细胞凋亡,pyroptotic细胞死亡的特征是渗透膨胀导致细胞增大和随后细胞膜的破裂,而线粒体膜保持完好。这导致促炎症因子的释放,如ATP,或蛋白质,能够招募中性粒细胞引起炎症的proIL-1a和HMGB1。    由于pyroptosis在细胞形态改变、分子机制上的独特性,以及对机体免疫应答与炎性反应调控的重要性,它逐渐成为目前的研究热点。    细胞焦亡主要特征为依赖于半胱天冬酶-1(caspase-1),并伴有大量促炎症因子的释放,快速启动机体天然免疫。天然免疫细胞通过形成炎性小体(Inflammasome)和将 Caspase-1 前体酶催化为 Caspase-1 的活性形式来应对病原体和其他危险信号。    炎性小体是一种被不同炎性刺激而被诱导生成的蛋白复合体,根据诱导或刺激的不同,会产生不同的炎性小体,主要包括:NLRP1 inflammasome,NL...
发布时间: 2017 - 05 - 22
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如果你跟全球大药厂的科研人员聊天说到CellTiter-Glo®细胞活力检测系统,他们总会亲切地称他为CTG。这个已经进入大药厂药物研发SOP多年的经典系统,一经推出,便用其超凡的性能征服了用户,并为药物研发的加速做出了不可忽视的贡献。CellTiter-Glo®细胞活力检测系统的魅力到底在哪里,今天就让小麦带你近距离接触一下这个传奇的检测系统。CTG我与你相见恨晚CellTiter-Glo® Luminescent Cell Viability Assay 简称CTG, 是通过对 ATP 进行定量来测定培养物中活细胞数目的一种快速均质检测方法。ATP 是活细胞新陈代谢的关键指标。与传统的MTT比色法不同,这种基于高灵敏度生物发光方法的检测技术,不受化合物自发荧光的影响,创造了操作时间和检测灵敏度的新高峰。  CTG-强到爆的性能操作简单到一步加入,无需去除培养基等多步操作,避免了这些步骤带来的误差;加入试剂后孵育10分钟即可检测;最低可检测到15个细胞的灵敏度。 这是目前任何比色法都无法企及的指标。基于上述特点,这个技术可完美地与高通量操作兼容,也为高通量药筛带来了福音。  综上所述,曾被MTT法虐了多年的小麦不知道为什么有种被亮瞎眼,相!见!恨!晚!的感觉。  下面献上部分Cel...
发布时间: 2017 - 05 - 05
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谷胱甘肽检测GSH-GloTM Glutathione Assay和GSH/GSSG-GloTM Assay GSH水平的改变对细胞毒性反应的评价非常重要,并且是氧化应激的重要指标,可能引起细胞凋亡或细胞死亡。  GSH-GloTM Assay 利用发光法检测和定量细胞和生物样品中的谷胱甘肽(GSH)。 反应原理:该反应由试剂盒中提供的谷胱甘肽S转移酶(DST)催化。生成的萤光素酶能在一个偶联反应中被检测到,即用Ultra-GloTM重组萤光素酶而产生“辉光型”发光信号,该信号与细胞中存在的谷胱甘肽的量成正比。 GSH/GSSG-GloTM Assay利用发光法检测和定量培养细胞中的总谷胱甘肽(GSH+GSSG)、GSSG以及GSH/GSSG比率的检测系统。 反应原理:在一个反应中,检测试剂用于测定谷胱甘肽的总含量-还原试剂将细胞裂解液中的所有谷胱甘肽(GSH+GSSG)都转变为还原型谷胱甘肽GSH检测。在另一个反应中,检测试剂只用于测定氧化型谷胱甘肽GSSG的含量。即先用一种试剂阻断所有的GSH,保持GSSG不变,之后将GSSG还原成GSH,并用发光反应来定量。 产品特点:发光法高灵敏度可检测细胞样品反应快速辉光型,半衰期长适用于高通量检测 相比传统方法,GSH/GSSG-GloTM Assay 使用...
发布时间: 2017 - 04 - 27
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4月11日上午,大连医科大学附属二院层流病房移植仓内,17岁的重型再生障碍性贫血女孩唐淞(化名)正在进行术前的各项治疗准备。和病魔搏斗了11年,女孩迎来了重生的希望,前不久她与父亲配型成功,近日将接受异基因造血干细胞移植。异基因造血干细胞移植(Allo-HSCT)是通过移植建立正常的者型的造血、免疫功能,取代受者自身病态的造血、免疫系统以达到治疗的目的。移植后早期嵌合状态与继发性移植排斥有明显的相关性,嵌合体的形成、演变与受者长期生存密切相关。移植后各细胞亚群的恢复时间并不相同,NK细胞是最先恢复正常并保持稳定的淋巴细胞,而且NK细胞在Allo-HSCT术后机体造血、免疫系统及其功能的恢复中还扮演着举足轻重的角色。因此,可以通过监测NK细胞的嵌合性评估受者移植后早期恢复状态,这就首先需要分选出NK细胞然后用于基因检测。那么如何分选NK细胞呢?高效分选NK细胞为了更快速地分选出高纯度、高活性的NK细胞,美天旎研发了MACSprep Chimerism CD56 MicroBeads, human磁珠(# 130-111-553)。与传统方法相比,此产品具有明显的优势:分选的细胞可用于嵌合率分析,监控造血干细胞移植后的嵌合状态。适用于诊断前的细胞富集,提高诊断分析的灵敏性直接从人全血样品分选,操作简单,省略洗涤步骤后也不影响细胞纯度和得率既可以手动分选,也可以用autoMACS...
发布时间: 2017 - 04 - 18
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