如果你跟全球大药厂的科研人员聊天说到CellTiter-Glo®细胞活力检测系统，他们总会亲切地称他为CTG。这个已经进入大药厂药物研发SOP多年的经典系统，一经推出，便用其超凡的性能征服了用户，并为药物研发的加速做出了不可忽视的贡献。CellTiter-Glo®细胞活力检测系统的魅力到底在哪里，今天就让小麦带你近距离接触一下这个传奇的检测系统。CTG我与你相见恨晚CellTiter-Glo® Luminescent Cell Viability Assay 简称CTG, 是通过对 ATP 进行定量来测定培养物中活细胞数目的一种快速均质检测方法。ATP 是活细胞新陈代谢的关键指标。与传统的MTT比色法不同，这种基于高灵敏度生物发光方法的检测技术，不受化合物自发荧光的影响，创造了操作时间和检测灵敏度的新高峰。 CTG-强到爆的性能操作简单到一步加入，无需去除培养基等多步操作，避免了这些步骤带来的误差；加入试剂后孵育10分钟即可检测；最低可检测到15个细胞的灵敏度。 这是目前任何比色法都无法企及的指标。基于上述特点，这个技术可完美地与高通量操作兼容，也为高通量药筛带来了福音。 综上所述，曾被MTT法虐了多年的小麦不知道为什么有种被亮瞎眼,相!见!恨!晚!的感觉。 下面献上部分Cel...
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Eastep® RT Master Mix 和Eastep® qPCR Master Mix是Promega上海生产基地——上海普洛麦格生物产品有限公司生产的最新逆转录和qPCR产品。Eastep® RT Master Mix名称目录号规格反应次数目录价Eastep® RT Master Mix (5×)LS2050100μl50次(10μl反应体系)380LS2052400μl200次(10μl反应体系)1099Eastep® RT Master Mix (5×) (包含No-RT Control)LS2054400μl200次(10μl反应体系)1099Eastep® RT Master Mix 是用来合成cDNA第一链的优质反转录反应试剂。本产品为5x预混液，主要成份包含高效率逆转录酶M-MLV、MgCl2、dNTP、Oligo(dT)15 Primer、Random Primers、RNase inhibitor和反应缓冲液，只需添加模板RNA和水即可迅速地开始反应。本产品适用于合成Real Time PCR用短链目的片段cDNA模板，能够进行高性能的基因表达分析；同时也适用于高效合成全长的cDNA模板,对扩增2K左右的片段效率更高。产品中加入gDNA Remover能有效去除RNA模板中的gD...
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2017
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来自人类细胞图谱联盟（Human Cell Atlas Consortium）的研究人员在利用强大的单细胞基因组分析工具了解人类早期发育和这如何能够影响健康或导致疾病方面迈出第一步。迄今为止，人类发育细胞图谱（Human Developmental Cell Atlas, HDCA）的初步项目已对100万个细胞中的四分之一进行了测序，而且首批数据分析正在进行中。HDCA计划将为所有对人类发育比较重要的细胞构建基因组参考图谱，这将彻底改变我们对健康和疾病（从流产、儿童发育障碍到癌症和衰老）的理解。视网膜细胞，图片来自Irene Whitney, laboratory of Joshua Sanes, Klarman Cell Observatory, Broad Institute of MIT and Harvard; Harvard University。HDCA是雄心勃勃的人类细胞图谱（HCA）的一部分，其中HCA是一个全球性的联盟，旨在通过绘制人体内每个细胞的图谱来改变生物研究和医学。2018年3月8日，在英国惠康基金会基因组校园（Wellcome Genome Campus）举行的国际HCA会议上，HDCA和HCA的其他方面取得的进展会被讨论。许多疾病起源于人体早期发育，因此详细地理解发育是解释人类健康和疾病的关键。来自英国惠康基金会桑格研究所和纽卡斯尔大学的研究人员从来自...
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2018
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[创新技巧]如何利用CRISPR改造植物基因组如今，CRISPR技术已经用于许多植物基因组的改造，包括著名的模式生物，如拟南芥和蒺藜苜蓿，以及重要的经济作物，如马铃薯、玉米、小麦、水稻和蘑菇等。尽管CRISPR系统在大多数物种中都通用，但涉及到植物细胞的编辑，还是不能一成不变。Addgene的Joel McDade在此介绍了植物基因组的改造，突出了CRISPR系统针对植物的特定改变，并概括了科研人员的植物基因组编辑工具。CRISPR的各个组分总的来说，之前的实验设计规则也适用于植物的基因编辑。不过，常用的CRISPR质粒可能需要做一些改变，才能在植物细胞中起作用。与其他模式系统一样，Cas9或Cas9变异体和单链向导RNA（gRNA）的表达就足以修饰植物的基因组。与其他生物一样，gRNA也是由~20个核苷酸的靶向序列和~75个核苷酸的支架序列组成，不过驱动gRNA表达的启动子则取决于所使用的细胞类型。在植物细胞中，gRNA的表达可通过植物特异的RNA pol III启动子来驱动，如AtU6、TaU6、OsU6或OsU3。Addgene提供了30多种不含gRNA的骨架，方便你插入靶向序列，最快构建好载体。目前，研究人员已经对一些Cas9变异体进行密码子优化，以加强在植物细胞中的翻译。同时，他们也使用缺乏核酸酶活性的Cas9激活物（如dCas9-VP64）或阻遏物（dCas9-KRAB...
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