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微卫星不稳定性及DNA错配修复微卫星是短串联重复DNA序列,长度1-6个碱基对。这些重复序列广泛存在于基因组中,并且由于其在基因座位点串联重复次数不同,这些重复序列的长度在不同个体中经常有差异。微卫星标志物可以用于检测微卫星不稳定性(基因组不稳定性的一种)。微卫星不稳定(Microsatellite Instability,MSI)是微卫星等位基因长度的改变,这种改变是由于DNA复制过程中重复单元的插入或删除以及DNA错配修复系统纠错失败造成的。 DNA错配修复(DNA mismatch repair system,MMR)是一类能识别并修复DNA复制及重组过程中的碱基的错误插入、删除或错配的系统,该修复系统主要包括4个蛋白,MLH、MSH2、MSH6和PMS2。微卫星对MMR易感,MMR系统正常时呈现微卫星稳定(Microsatellite Stable,MSS),缺失某个MMR蛋白功能时导致MMR系统缺陷,致微卫星复制错误累积,呈现微卫星不稳定(MSI)。组织出现MSI也即意味着DNA错配修复系统(MMR)失活。最新的研究表明:伴随着MMR失活的MSI表型是临床上的一项重要的肿瘤标志物。 MSI检测用于筛查林奇综合症结直肠癌(Colorectal Cancer,CRC)发生的遗传因素包括染色体不稳定性(Chromosome Instability,CIN)和...
发布时间: 2017 - 06 - 15
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Glucose Uptake-Glo Assay 是一种非放射性的、基于培养板的、均相生物发光检测系统,用于检测哺乳动物细胞的葡萄糖摄取。优势非放射性:与传统放射性方法基于相同底物,但采用发光检测步骤简单,均质检测:加入2DG后,无需洗涤---所有步骤都是加入灵敏,线性范围宽:试剂盒可以检测0.5-30μM 2 DG6P,低至5000个细胞,信号背景比3兼容自动化检测:“加样-混合-读数”的简单操作方式可与自动化高通量工作流程兼容;反应可扩展至96-和384-孔板结果可靠,重复性好:Glucose Uptake-Glo Assay得到的Z‘因子0.5  产品规格目录号Glucose Uptake-Glo Assay5mlJ134110mlJ134250mlJ1343 原理:试剂盒基于对2-脱氧葡萄糖-6-磷酸(2DG6P)的检测  更安全、更简单(和传统放射性方法相比)和传统放射性方法相比,信号背景比一致对不同数量的CHT116细胞,分别应用传统2DG放射性方法或Glucose Uptake-Glo Assay检测葡萄糖摄取。 注意:传统放射性方法,除了有潜在放射性物质产生的危害及专门的同位素实验室要求,还需要严格的流程、专业的培训和更高费用以处理放射性废物传统放射性方法,在操作上需要多步骤洗涤,操作繁琐,并可能在洗涤过程...
发布时间: 2017 - 06 - 09
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细胞凋焦亡(pyroptosis)也被称作Caspase 1-依赖的细胞死亡,是近年来发现并证实的一种新的程序性细胞死亡方式,是机体在感知病原微生物浸染后启动的免疫防御反应(炎症反应),在拮抗和清除病原感染以及内源危险信号中发挥重要作用。过度的细胞焦亡会诱发多种自身炎症性和自身免疫性疾病。    不同于细胞凋亡,pyroptotic细胞死亡的特征是渗透膨胀导致细胞增大和随后细胞膜的破裂,而线粒体膜保持完好。这导致促炎症因子的释放,如ATP,或蛋白质,能够招募中性粒细胞引起炎症的proIL-1a和HMGB1。    由于pyroptosis在细胞形态改变、分子机制上的独特性,以及对机体免疫应答与炎性反应调控的重要性,它逐渐成为目前的研究热点。    细胞焦亡主要特征为依赖于半胱天冬酶-1(caspase-1),并伴有大量促炎症因子的释放,快速启动机体天然免疫。天然免疫细胞通过形成炎性小体(Inflammasome)和将 Caspase-1 前体酶催化为 Caspase-1 的活性形式来应对病原体和其他危险信号。    炎性小体是一种被不同炎性刺激而被诱导生成的蛋白复合体,根据诱导或刺激的不同,会产生不同的炎性小体,主要包括:NLRP1 inflammasome,NL...
发布时间: 2017 - 05 - 22
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如果你跟全球大药厂的科研人员聊天说到CellTiter-Glo®细胞活力检测系统,他们总会亲切地称他为CTG。这个已经进入大药厂药物研发SOP多年的经典系统,一经推出,便用其超凡的性能征服了用户,并为药物研发的加速做出了不可忽视的贡献。CellTiter-Glo®细胞活力检测系统的魅力到底在哪里,今天就让小麦带你近距离接触一下这个传奇的检测系统。CTG我与你相见恨晚CellTiter-Glo® Luminescent Cell Viability Assay 简称CTG, 是通过对 ATP 进行定量来测定培养物中活细胞数目的一种快速均质检测方法。ATP 是活细胞新陈代谢的关键指标。与传统的MTT比色法不同,这种基于高灵敏度生物发光方法的检测技术,不受化合物自发荧光的影响,创造了操作时间和检测灵敏度的新高峰。  CTG-强到爆的性能操作简单到一步加入,无需去除培养基等多步操作,避免了这些步骤带来的误差;加入试剂后孵育10分钟即可检测;最低可检测到15个细胞的灵敏度。 这是目前任何比色法都无法企及的指标。基于上述特点,这个技术可完美地与高通量操作兼容,也为高通量药筛带来了福音。  综上所述,曾被MTT法虐了多年的小麦不知道为什么有种被亮瞎眼,相!见!恨!晚!的感觉。  下面献上部分Cel...
发布时间: 2017 - 05 - 05
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