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树突状细胞(DCs)作为一种专职性抗原提呈细胞,是适应性免疫的基石。研究表明,基于DC的疫苗在肿瘤治疗中具有巨大的免疫治疗潜力。在基础研究和免疫治疗中会用到大量DCs细胞,通常,我们是用单核细胞经过特定的分化/成熟步骤在体外生产DCs的,即单核细胞来源的树突状细胞(Mo-DCs)。为了获得成熟、功能性Mo-DCs(单核细胞来源的DCs),很重要的一点就是,要使用可靠的流程和可靠的试剂。下面,我们来介绍一下美天旎Mo-DCs完整解决方案,包括单核细胞分选、诱导分化/成熟、表型鉴定及功能检测等过程。单核细胞分离使用美天旎CD14磁珠从健康供者PBMCs分选出CD14+单核细胞。用CD14-FITC抗体、PI进行流式细胞仪检测。结果显示,分选出的CD14+单核细胞的纯度为96.8±3.8%,得率为81.3±8.8%%,活性为97.5±1.4%。Mo-DCs的分化、成熟Day0:分离出的单核细胞(3×10⁶ cells)用3 mL的完全培养基(RPMI 1640, 2 mM L-glutamine, 1% autologous plasma),添加250 IU/mL IL-4 、800 IU/mL GM-CSF进行培养。Day 2:从培养体系吸出1.5 mL,离心。用1.5 mL完全培养基加2倍浓度的IL-4和 GM-CSF,再添加到原培养体系中。D...
发布时间: 2017 - 02 - 06
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无细胞蛋白表达技术:是指用含有蛋白合成必需的组分(核糖体,转运RNA,氨酰合成酶,启动/延伸/终止因子,三磷酸鸟苷,ATP,Mg2+和K+)的细胞裂解物体外进行蛋白合成。    与传统的基于细菌或真核细胞的蛋白表达相比,无细胞蛋白表达系统有着独特的优势,节省时间,提高功能性、可溶性全长蛋白的产量,在体外合成蛋白,仅需几个小时,而不是几天,就可以表达出目的蛋白。    Promega提供丰富的无细胞蛋白表达产品供您选择,系统包括原核表达系统和真核表达系统,反应模板类型也可灵活选择,环状、线性DNA模板、PCR产物、RNA模板等均有对应的合适产品,可在大约1-4h表达出您所需要的功能性目的蛋白。Promega无细胞蛋白表达系统优势产品丰富,灵活选择最合适产品快速获得目的蛋白,从数天缩短至几小时操作步骤大幅减少更易获得可溶性蛋白下游应用广泛表达有毒蛋白引用文献数千篇无细胞蛋白表达系统的下游应用蛋白相互作用研究蛋白:核酸相互作用蛋白结构研究翻译后修饰酶学检测......Promega无细胞蛋白表达系统分类真核无细胞蛋白表达系统兔网织红细胞裂解物系统昆虫细胞提取物系统麦胚提取物系统原核无细胞蛋白表达系统大肠杆菌提取物系统表1.Promega 无细胞蛋白表达比较表:模板、应用及产率订货信息如您感兴趣,欢迎您随时联系我们!
发布时间: 2017 - 01 - 17
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一、细胞分析类新产品 1、基因工程重组类流式抗体--人 Anti-Claudin-3、Anti-HLA-DR、Anti-IFN-γ、Anti-IL-22、Anti-IL-8、Anti-PEAR1、CD107a (LAMP-1)、CD146、CD1a、CD20、CD314 (NKG2D)、CD326 (EpCAM)、CD335 (NKp46)、CD36、CD57、CD61 2、基因工程重组类流式抗体——人/小鼠 Anti-Ki-67 3、基因工程重组类流式抗体——小鼠 Anti-FoxP3、Anti-IgD、CD102 (ICAM-2)、CD103、CD117、CD202b (TIE-2)、CD21/CD35、CD223、CD257 (BAFF)、CD31、CD73 4、杂交瘤抗体 Anti-HLA-G pure, Human、Anti-IgG1, mouse、Anti-IL-10, mouse、Anti-IL-13, human、Anti-IL-13, human、Anti-IL-17A-, human、Anti-IL-2、human、Anti-IL-5-Vio667, human 5、同型对照抗体 Rat IgG1-Vio667、Rat IgG2a-Vio667、Rat IgG2b...
发布时间: 2016 - 12 - 28
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双报告基因经常被用于提高实验的准确性。“双报告”一词指的是在同一个实验体系内同时表达和检测两种不同的用作报告蛋白的酶。通常“实验组”报告基因反映的是某特定的实验条件所导致的效应,而共转染的“对照组”报告基因的活性则提供一个内对照,作为基线水平的反映,可将用于细胞活力或转染效率所引起的样品间差异减至最小。其他原因引起的误差,如加样体积的差异,细胞裂解效率和检测效率的差异等,均可被有效的降低。   Promega公司开发了Dual-Luciferase Reporter(DLRTM)检测试剂盒与Dual-DLRTM 检测试剂盒,实现了针对同一样品依次检测萤火虫荧光素酶和海肾萤光素酶。通过将实验体系中目的基因反应与无关因素的影响加以区分,DLRTM与Dual-DLRTM 检测试剂盒可提供快速而便利的检测方法,用来解释报告基因数据的生物学意义。Dual-Luciferase 检测系统特点:带有海肾萤光素酶作为内对照:与但报告基因相比较,结果更准确。方便的单孔检测模式:不需要将样品分成几份在进行报告基因的检测。快速:两种报告基因的检测均可在几秒钟之内完成。灵敏度高:可进行弱启动子、低表达/调控水平、低转染效率时蛋白表达的研究。线性范围宽:线性范围覆盖酶浓度的7个数量级,通常不需要对活性非常高的样品进行稀释。背景低:哺乳动物细胞中无内源性报告基因的表达。 Dual...
发布时间: 2017 - 01 - 11
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