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双报告基因经常被用于提高实验的准确性。“双报告”一词指的是在同一个实验体系内同时表达和检测两种不同的用作报告蛋白的酶。通常“实验组”报告基因反映的是某特定的实验条件所导致的效应,而共转染的“对照组”报告基因的活性则提供一个内对照,作为基线水平的反映,可将用于细胞活力或转染效率所引起的样品间差异减至最小。其他原因引起的误差,如加样体积的差异,细胞裂解效率和检测效率的差异等,均可被有效的降低。   Promega公司开发了Dual-Luciferase Reporter(DLRTM)检测试剂盒与Dual-DLRTM 检测试剂盒,实现了针对同一样品依次检测萤火虫荧光素酶和海肾萤光素酶。通过将实验体系中目的基因反应与无关因素的影响加以区分,DLRTM与Dual-DLRTM 检测试剂盒可提供快速而便利的检测方法,用来解释报告基因数据的生物学意义。Dual-Luciferase 检测系统特点:带有海肾萤光素酶作为内对照:与但报告基因相比较,结果更准确。方便的单孔检测模式:不需要将样品分成几份在进行报告基因的检测。快速:两种报告基因的检测均可在几秒钟之内完成。灵敏度高:可进行弱启动子、低表达/调控水平、低转染效率时蛋白表达的研究。线性范围宽:线性范围覆盖酶浓度的7个数量级,通常不需要对活性非常高的样品进行稀释。背景低:哺乳动物细胞中无内源性报告基因的表达。 Dual...
发布时间: 2017 - 01 - 11
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HaloTag®蛋白标签技术是基于经过改造的催化活性缺失的细菌水解酶,蛋白大小为34kDa,在生理条件下能与氯化烷烃配基(HaloTag®配基)结合形成高度特异性不可逆的共价键。通过使用不同的配基可控制带有HaloTag®蛋白标签的待测蛋白的功能和应用。HaloTag®系统具有从细胞学实验到生化实验的广泛应用灵活性,无需转换融合蛋白标签或重新克隆。    Promega提供HaloTag®克隆载体及配基。HaloTag®载体包括多克隆位点载体和专利的Flexi®克隆技术的载体。配基包括细胞渗透性和非渗透性荧光配基、生物素配基及反应性配基,反应性配基可用于建立自定义的HaloTag®连接结构。  HaloTag®配基(氯化烷烃+功能基团)荧光配基:用于细胞成像,蛋白相互作用检测(BRET)。具有不同颜色的荧光基团。非荧光配基:用于蛋白检测,如生物素Biotin,PEG-Biotin。表面配基:用于蛋白纯化,蛋白相互作用研究(Pull-down),磁珠,树脂,微阵列芯片。反应性配基:用于连接功能基团,如正电子成像术(PET)配基,磁共振试剂。技术优势最小化背景:HaloTag®蛋白标签与其他哺乳细胞蛋白没有同源性。不可逆的共价结合:Hal...
发布时间: 2016 - 12 - 26
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循环游离DNA(Circulating cell free DNA, CCFDNA)于1948年被首次发现。随后的研究发现,和健康人相比,在自身免疫疾病、癌症病人中的ccfDNA水平增高。ccfDNA是十分有应用前景的 biomarker,在疾病的早期诊断、预后、监测等方面具有重要潜在价值。具体应用可能包括:       1. 用于产前诊断       2. 用于免疫性疾病等非肿瘤类疾病的病情分析与疗效观察       3. 用于肿瘤相关分析           对于ccfDNA的研究可能具有很高的应用价值,但ccfDNA的含量很低,从血浆中提取的难度大。同时下游的检测,对ccfDNA的纯化质量也有很高的要求。所以选择合适的ccfDNA纯化方法是开展后续研究非常关键的第一步。
发布时间: 2016 - 12 - 26
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发布时间: 2016 - 12 - 26
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