Promega新品来啦-ProAlanase, 蛋白质组学研究中胰蛋白酶的最新替代品
日期：
2021-07-13
浏览次数:
392
说起胰蛋白酶，相信做过蛋白质组学研究的伙伴们都再熟悉不过了。胰蛋白酶作为最为经典的质谱分析样品制备用蛋白酶被广泛使用。不过用胰蛋白酶消化通常提供不完整的序列覆盖或翻译后修饰的缺失鉴定。与胰蛋白酶一样，其他蛋白酶如Lys-C、Asp-N、Glu-C和Arg-C也会在带电荷的残基上裂解，从而使蛋白质中被消化的区域产生偏向。
Promega推出的新产品ProAlanase，它在蛋白质组中独特的、非带电的位点上裂解。ProAlanase是一种内切蛋白酶，优先切割蛋白中脯氨酸C末端，其次切割丙氨酸。从黑曲霉中分离纯化的ProAlanase也被称为An-PEP或EndoPro。用ProAlanase消化蛋白质得到的多肽适合于质谱鉴定和表征分析。
ProAlanase羧基端切割特异性。人K562提取物在pH值1.5，37℃下用ProAlanase消化2小时，使用1:100 酶:底物比。进行LC-MS /MS进行分析后，以ByonicTM软件进行数据分析。切割主要发生在脯氨酸和丙氨酸的羧基端。
pH 1.5时消化最佳
ProAlanase在pH为1.5时表现出最佳的肽识别性和脯氨酸特异性。
蛋白消化时间短性能表现最佳
短时间的消化可使ProAlanase达到最佳的消化效率和特异性。较长的消化时间反而会导致特异性的丧失(左)，而消化效率也没有明显提高(右)。
Hot News
/
相关推荐
2020
-
06
-
09
点击次数:
83
细菌是一种具有侵略性的生物，它们已经进化出了一系列严酷的策略来杀死和抑制竞争对手。这些策略中最极端的一种是细胞主动分裂并死亡，以释放大量的毒素来杀死其他菌株。虽然我们知道一些细菌会这样做，但这种行为是否具有普遍性还不得而知。近日，发表在《Current Biology（当代生物学）》上的一项新研究中，来自英国牛津大学动物和生物化学系的研究人员发现，在细菌大战中，为了打败竞争对手，交战的细菌会进行大...
2019
-
12
-
25
点击次数:
98
电子显微镜下的假单胞菌细菌。图片来源：MPIIB / Volker Brinkmann近日，发表在《Science》上的一项研究中，来自德国马克斯·普朗克感染生物学研究所（MPIIB）的科学家们发现，人体具有一个特殊受体，它虽然不能识别细菌本身，但可以很好地监视细菌间的通信，持续监测感染动态，当有大量细菌存在以至于分泌出被称为毒力因子的致病物质时，该受体会向宿主发出调整免疫反应的信号。细...
2019
-
04
-
22
点击次数:
229
樱桃大小的“人造心脏”当地时间这周一，来自以色列特拉维夫大学的科学家们利用3D打印技术，造出一颗mini版“心脏”，更惊喜的是，这一“人工心脏”具有细胞、血管、心室和心房。虽然这一人工心脏很小，类似于兔子心脏的大小，但是科学家们希望沿着这一突破，未来有一天能够研发出适合临床移植的“人造心脏”，以及能够契合、修复有缺陷心脏的“补丁”。团队负责人Tal Dvir表示，过去已有3D打印心脏的尝试，但是并...
2019
-
04
-
10
点击次数:
92
大脑在睡眠过程中的各项活动可以加强生物的学习能力和记忆能力。在这个过程中，睡眠中的大脑可帮助人们记忆白天发生的事或学习到的知识技能，还可以选择性地记住或遗忘掉某些不想要的情感经历。 睡觉时还能记单词，不再只是梦想？！ 睡觉，可以说是人类一辈子当中，占据最多时间的事情了，普通人一生中有将近1/3的时间都是在睡眠中度过的。 然而在世界上，有少量人仅仅需要很少的睡眠时间，就...