HaloTag®蛋白标签技术是基于经过改造的催化活性缺失的细菌水解酶,蛋白大小为34kDa,在生理条件下能与氯化烷烃配基(HaloTag®配基)结合形成高度特异性不可逆的共价键。通过使用不同的配基可控制带有HaloTag®蛋白标签的待测蛋白的功能和应用。HaloTag®系统具有从细胞学实验到生化实验的广泛应用灵活性,无需转换融合蛋白标签或重新克隆。
Promega提供HaloTag®克隆载体及配基。HaloTag®载体包括多克隆位点载体和Flexi®克隆技术的载体。配基包括细胞渗透性和非渗透性荧光配基、生物素配基及反应性配基,反应性配基可用于建立自定义的HaloTag®连接结构。
HaloTag®配基(氯化烷烃+功能基团)
荧光配基:用于细胞成像,蛋白相互作用检测(BRET)。具有不同颜色的荧光基团。
非荧光配基:用于蛋白检测,如生物素Biotin,PEG-Biotin。
表面配基:用于蛋白纯化,蛋白相互作用研究(Pull-down),磁珠,树脂,微阵列芯片。
反应性配基:用于连接功能基团,如正电子成像术(PET)配基,磁共振试剂。
技术优势
最小化背景:HaloTag®蛋白标签与其他哺乳细胞蛋白没有同源性。
不可逆的共价结合:HaloTag®蛋白与配基的共价结合允许强力的冲洗,从而背景更低。
多重应用:一个融合蛋白标签,可满足您多方面的需求。如细胞成像,蛋白表达纯化,蛋白功能测定,高内涵筛选等。
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HaloTag®技术简要操作流程示意图
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注:也可在Kazua Halo Tag®克隆寻找您所需要的蛋白,省去克隆的操作。
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