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时间: 2017 - 01 - 17
DPPIV-Glo™ 蛋白酶检测试剂盒系统提供了DPPIV 底物,该底物为发光前体,Gly-Pro- 氨基萤光素,上述物质存在于经过优化的缓冲系统中,可确保DPPIV 和萤光素酶发挥活性。加入单溶液的DPPIV-Glo™ 试剂,只需" 加样- 混合- 检测" 个步骤,DPPIV 即作用于底物,并通过萤光素酶反应产生" 辉光型" 发光信号。在这种均质的双酶偶联的反应中,该发光信号的强弱与DPPIV 酶的活力成正比。该试剂盒专为检测纯化的酶制剂而设计。特点 - 优点. 简化的方法:均质的" 加样- 混合- 检测" 三个简单步骤使其更适于自动化操作。• 更高的灵敏度:该方法比普通基于化学荧光的DPPIV 检测法灵敏度更高,与化学荧光检测法相比,发光检测法避免了固有的背景荧光信号的干扰。使信号背景比更好。这种检测方法的线性范围超过了DPPIV 浓度的三个数量级,可以检测到少于1pg/ml的酶量。• 更快地得到结果:信号只需在试剂加入30分钟后即可达到最强( 和最高灵敏度),与化学荧光反应不同,发光信号不依赖于蛋白剪切产物的积累。• 可...
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时间: 2017 - 01 - 17
Protease-Glo™ Assay (Protease-Glo™ 检测试剂盒) 是一种检测蛋白酶活性的新方法,该试剂盒采用一种经基因工程改造过的萤火虫(Photinus pyralis ) 萤光素酶,是GloSensor™ 平台技术的一个代表。该试剂盒使用一种环状序列突变的萤火虫萤光素酶,即GloSensor™ -10F 蛋白,该分子上带有蛋白酶的识别位点,可作为蛋白酶底物。使用该检测系统时,可通过分子克隆和偶联的转录/ 翻译无细胞表达系统快速产生蛋白酶底物,从而很容易对蛋白酶功能作出评估。实验时,需设计出对蛋白酶识别序列进行编码的寡核苷酸,并将其克隆至GloSensor™ -10F 基因上,后者位于线性载体上。然后,将包含目的蛋白酶位点的GloSensor™ 蛋白在无细胞表达系统中合成出来,随后作为蛋白酶底物使用。蛋白酶识别序列被剪切后,激活了GloSensor™ 蛋白,并产生发光。发光水平与蛋白酶活性具有相关性。Protease-Glo™检测试剂盒具有生物发光检测的优势:定量简单、灵敏度高,动态范围宽。访问Protease-Glo™ Assay Design Tool ...
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时间: 2017 - 01 - 17
GloResponse™ CRE-luc2P HEK293 Cell Line 2 vials E8500GloResponse™ NFAT-RE-luc2P HEK293 Cell Line 2 vials E8510GloResponse™ NF-κB-RE-luc2P HEK293 Cell Line 2 vials E8520GloResponse™ 9XGAL4UAS-luc2P HEK293 Cell Line 2 vials E8530GPCR 能调控广泛的生物学功能,是药物发现中最重要的靶点之一。根据 G 蛋白 α 亚基的不同可把 GPCR 信号通路分为三类:Gs、Gi/o 和 Gq。GloResponse™ CRE-luc2P HEK293 Cell Line 可应用于Gs、Gi/o 偶联的 GPCR(其信号通过 cAMP 和 CRE 传导)的研究,并可用其设定筛选用的检测方法。对于 Gq 偶联的 GPCR(其信号通过钙离子释放和激活“活化 T 细胞的核因子的反应元件,NFATRE”),应该使用 GloResponse™ NFAT-RE...
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时间: 2017 - 01 - 17
GloSensor™ cAMP HEK293 Cell Line 2 vials E1261pGloSensor™-22F cAMP Plasmid 20μg E2301pGloSensor™-20F cAMP Plasmid 20μg E1171GloSensor™ cAMP Reagent 25mg E1290GloSensor™ cAMP Reagent 250mg E1291      将目的受体和该生物传感器在选定的细胞系中进行瞬时表达时,研究者可使用GloSensor™ cAMP 检测试剂盒进行检测。此外,还可以创造出同时被生物传感器和目的受体基因转染的稳定细胞系。操作过程很简单:用GloSensor™ cAMP Reagent (GloSensor™ cAMP试剂) 预平衡细胞大约2 小时;然后用特定的激动剂/ 拮抗剂或者未知活性的化合物处理细胞,10-30 分钟后检测发光。无需其它加样步骤或者操作过程。大部分带有自动进样器的常用发光检测仪都能检测,比如GloMax® 系列发光检测仪...
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时间: 2017 - 01 - 17
Proteasome-Glo™ Chymotrypsin-Like Assay 10ml G8621Proteasome-Glo™ Chymotrypsin-Like Assay 50ml G8622Proteasome-Glo™ Trypsin-Like Assay 10ml G8631Proteasome-Glo™ Trypsin-Like Assay 50ml G8632Proteasome-Glo™ Caspase-Like Assay 10ml G8641Proteasome-Glo™ Caspase-Like Assay 50ml G8642Proteasome-Glo™ 3-Substrate System 10ml G8531Proteasome-Glo™ 3-Substrate System 50ml G8532Proteasome-Glo™ 检测试剂盒在缓冲液中提供可发光的蛋白酶体底物,该试剂经过了优化,使细胞通透性、蛋白酶体活性和萤光素酶活性均达到最佳。以“加样- 混合- 检测”的方式加Proteas...
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时间: 2017 - 01 - 17
Proteasome-Glo™ Chymotrypsin-Like Cell-Based Assay 10ml G8660Proteasome-Glo™ Chymotrypsin-Like Cell-Based Assay 5 × 10ml G8661Proteasome-Glo™ Chymotrypsin-Like Cell-Based Assay 2 × 50ml G8662Proteasome-Glo™ Trypsin-Like Cell-Based Assay 10ml G8760Proteasome-Glo™ Trypsin-Like Cell-Based Assay 5 × 10ml G8761Proteasome-Glo™ Caspase-Like Cell-Based Assay 10ml G8860Proteasome-Glo™ Caspase-Like Cell-Based Assay 5 × 10ml G8861Proteasome-Glo™ 3-Substrate C...
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时间: 2017 - 01 - 17
Calpain-Glo™ 蛋白酶检测试剂盒中提供一种琥珀酰( 该物质为发光前体,是钙蛋白酶(calpain)底物,即Suc-LLVY- 氨基萤光素),储存于一种经过优化的缓冲液中。加入Calpain-Glo™ 单溶液试剂,只需“加样- 混合- 检测”三个步骤,即可使钙蛋白酶切割底物,并迅速进入萤光素酶反应,产生“辉光型”的发光信号。该发光信号的强弱与钙蛋白酶的活力成正比。此系统专为检测纯化的酶制剂而设计。特点 - 优点. 快速得到结果:这种均质的酶偶联反应模式非常适合自溶酶( 如钙蛋白酶) 的测定;当酶完全作用时,反应10 分钟后灵敏度达到最高。• 操作简便:均质的“加样- 混合- 检测”三个简单步骤使得自动化操作成为可能。• 灵敏度更高:该试剂盒比竞争性化学荧光检测试剂盒的灵敏度高出1,000 倍。与化学荧光检测试剂盒相比,发光检测试剂盒避免了背景荧光信号的干扰,提供了完美的信号背景比。该试剂盒的线性范围超过钙蛋白酶浓度的4 个数量级。应用用于在多孔板内测量钙蛋白酶的活性或抑制性。Figure 1. Sensitivity of the Calpain-Glo™ Protease A...
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时间: 2017 - 01 - 17
人重组类胰蛋白酶的上市有助于对胰酶和肥大细胞的生物学功能有更直接和全面的研究,并可以辅助进行类胰蛋白酶体内靶标的鉴定。重组人表皮 βI 类胰蛋白酶(rhSkin β Tryptase)与重组人肺 βII 类胰蛋白酶(rhLung β Tryptase)均是中性丝氨酸蛋白酶。人源 β 类胰蛋白酶已被成功克隆,并在毕赤酵母(Pichia pastoris)中表达,为具有活性的四聚体酶,经亲和层析纯化。这两种酶有不同的缓冲液配方、酶浓度和糖基化特征。提供的 rhLung Tryptase 溶于缓冲能力很低但浓度很高(2mg/ml)的缓冲液中,不含肝素,用于色谱分析。将这两种重组酶连同天然的肺类胰蛋白酶进行糖苷酶消化,然后使用 Western 分析,结果显示 rhLung Tryptase 的糖基化特征与尸酶非常相似。特异活性:以 0.4mM NαCBZ-L- 赖氨酸硫代苯酯作底物,与 Ellman`s Reagent(5,5`-Dithio-bis(5-Nitrobenzoic Acid))共同应用时,在 1ml 的最终体积下,检测水解率,在 25℃条件下孵育 ...
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